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高效液相色譜儀的組成部分及各部分的作用

  • 更新日期:2023-06-01      瀏覽次數(shù):4983
    •    高效液相色譜儀器的結(jié)構(gòu):
        1.進樣系統(tǒng):一般采用隔膜注射進樣器或高壓進樣間完成進樣操作不負眾望,進樣量是恒定的深入各系統。這對提高分析樣品的重復(fù)性是有益的。
        2.輸液系統(tǒng):該系統(tǒng)包括高壓泵發展的關鍵、流動相貯存器和梯度儀三部分道路。高壓泵的一般壓強,流速可調(diào)且穩(wěn)定真諦所在,當(dāng)高壓流動相通過層析柱時指導,可降低樣品在柱中的擴散效應(yīng),可加快其在柱中的移動速度充分,這對提高分辨率進一步完善、回收樣品、保持樣品的生物活性等都是有利的競爭力。流動相貯存錯和梯度儀調整推進,可使流動相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變,包括改變洗脫液的極性機製性梗阻、離子強度機製、PH值,或改用競爭性抑制劑或變性劑等集成應用。這就可使各種物質(zhì)(即使僅有一個基團的差別或是同分異構(gòu)體)都能獲得有效分離探討。
        在分離原理,儀器構(gòu)造及應(yīng)用范圍上高效流通,比較氣相色譜及液相色譜有什么異同點調解製度。
        1、氣相:氣相色譜是一種物理的分離方法.利用被測物質(zhì)各組分在不同兩相間分配系數(shù)(溶解度)的微小差異,當(dāng)兩相作相對運動時,這些物質(zhì)在兩相間進行反復(fù)多次的分配,使原來只有微小的性質(zhì)差異產(chǎn)生很大的效果,而使不同組分得到分離有效性。
        2創新內容、液相:高效液相色譜法是在經(jīng)典色譜法的基礎(chǔ)上,引用了氣相色譜的理論,在技術(shù)上,流動相改為高壓輸送(最高輸送壓力可達4.9′107Pa);色譜柱是以特殊的方法用小粒徑的填料填充而成,從而使柱效大大高于經(jīng)典液相色譜(每米塔板數(shù)可達幾萬或幾十萬);同時柱后連有高靈敏度的檢測器,可對流出物進行連續(xù)檢測。
        流動相貯存錯和梯度儀善於監督,可使流動相隨固定相和樣品的性質(zhì)而改變集成技術,包括改變洗脫液的極性、離子強度更合理、PH值適應能力,或改用競爭性抑制劑或變性劑等。這就可使各種物質(zhì)(即使僅有一個基團的差別或是同分異構(gòu)體)都能獲得有效分離各方面。
        分離系統(tǒng)該系統(tǒng)包括色譜柱防控、連接管和恒溫器等。色譜柱一般長度為10~50cm(需要兩根連用時善謀新篇,可在二者之間加一連接管)增產,內(nèi)徑為2~5mm,由"優(yōu)質(zhì)不銹鋼或厚壁玻璃管或鈦合金等材料制成方法,住內(nèi)裝有直徑為5~10μm粒度的固定相(由基質(zhì)和固定液構(gòu)成).固定相中的基質(zhì)是由機械強度高的樹脂或硅膠構(gòu)成行動力,它們都有惰性(如硅膠表面的硅酸基因基本已除去)、多孔性(孔徑可達1000?)和比表面積大的特點切實把製度,加之其表面經(jīng)過機械涂漬(與氣相色譜中固定相的制備一樣)保供,或者用化學(xué)法偶聯(lián)各種基因(如磷酸基、季胺基進行部署、羥甲基責任、苯基、氨基或各種長度碳鏈的烷基等)或配體的有機化合物保護好。
     
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